Die OVA "Hakuōki" spielt in der späten Edo-Zeit Japans und verbindet historische Ereignisse mit übernatürlichen Elementen. Die Handlung dreht sich um Chizuru Yukimura, eine junge Frau, die sich auf die Suche nach ihrem verschwundenen Vater begibt. Dabei gerät sie in die Wirren des Konflikts zwischen den Shinsengumi, einer berühmten Samurai-Einheit, und den Oni, mystischen Kreaturen mit übermenschlichen Kräften. Chizuru wird von den Shinsengumi aufgenommen und erfährt, dass ihr Vater an der Erschaffung des "Wasser der Verjüngung" beteiligt war, einer Substanz, die Menschen in Oni verwandeln kann.

Die Shinsengumi, angeführt von Kondō Isami, bestehen aus charismatischen und komplexen Charakteren wie Hijikata Toshizō, dem strengen Vize-Kommandanten, und Okita Sōji, einem begabten, aber kranken Schwertkämpfer. Im Laufe der Geschichte wird deutlich, dass einige Mitglieder der Shinsengumi das "Wasser der Verjüngung" konsumiert haben, um ihre Kampfkraft zu steigern, was jedoch schwerwiegende Nebenwirkungen mit sich bringt. Chizuru wird Zeugin der inneren Konflikte und moralischen Dilemmata, mit denen die Shinsengumi konfrontiert sind, während sie gleichzeitig versucht, das Geheimnis um ihren Vater zu lüften.

Die Handlung vertieft sich in die politischen Unruhen der Zeit, insbesondere den Aufstieg der kaiserlichen Loyalisten und den Niedergang des Tokugawa-Shogunats. Die Shinsengumi kämpfen darum, ihre Loyalität und ihren Ehrenkodex in einer sich schnell verändernden Welt aufrechtzuerhalten. Gleichzeitig wird die Beziehung zwischen Chizuru und den Mitgliedern der Shinsengumi immer enger, insbesondere zu Hijikata und Okita, die sie beschützen und ihr Vertrauen schenken.

Die OVA beleuchtet auch die tragischen Aspekte der Geschichte, da viele Charaktere mit den Konsequenzen ihrer Entscheidungen und dem unvermeidlichen Untergang ihrer Ära konfrontiert werden. Die übernatürlichen Elemente, insbesondere die Oni und das "Wasser der Verjüngung", dienen als Metapher für die menschliche Gier nach Macht und die daraus resultierenden Zerstörungen. Die Erzählung bleibt eng mit den historischen Ereignissen verbunden, während sie gleichzeitig eine emotionale Tiefe durch die persönlichen Schicksale der Charaktere erreicht.