"Princess 69: Midnight Gymnastics" (OVA) handelt von einer Gruppe von Schülerinnen, die an einer exklusiven Mädchenschule eingeschrieben sind. Die Handlung konzentriert sich auf die Protagonistin, eine talentierte Turnerin, die in ein geheimes nächtliches Training involviert wird. Dieses Training wird von einer mysteriösen Lehrerin geleitet, die ungewöhnliche Methoden anwendet, um die Fähigkeiten der Schülerinnen zu verbessern. Im Laufe der Geschichte wird deutlich, dass das Training nicht nur körperliche, sondern auch psychologische Herausforderungen mit sich bringt.

Die Schülerinnen werden in eine Reihe von unkonventionellen Übungen eingeweiht, die oft an die Grenzen ihrer körperlichen und emotionalen Belastbarkeit gehen. Die Dynamik zwischen den Charakteren entwickelt sich, während sie gemeinsam die Herausforderungen des Trainings meistern und dabei ihre individuellen Stärken und Schwächen erkennen. Die Handlung erforscht Themen wie Wettbewerb, Freundschaft und Selbstfindung, während die Charaktere mit den Erwartungen ihrer Umgebung und ihren eigenen Ambitionen konfrontiert werden.

Die Hauptfiguren umfassen die Protagonistin, deren Entschlossenheit und Hingabe im Mittelpunkt der Geschichte stehen, sowie ihre Mitschülerinnen, die jeweils unterschiedliche Persönlichkeiten und Hintergründe haben. Die mysteriöse Lehrerin fungiert als Antriebskraft der Handlung, deren wahre Motive und Methoden im Verlauf der OVA allmählich enthüllt werden. Die Erzählung bleibt auf die Entwicklung der Charaktere und ihre Interaktionen fokussiert, während sie die ungewöhnlichen Umstände des nächtlichen Trainings durchlaufen.